分歧桿菌在經過加熱和延長染色時間來促進著色。分歧桿菌中的分歧桿酸與染料結合后，很難被酸性脫色劑脫掉顏色，所以才會有了抗酸染色。

結核分枝桿菌對苯胺染料一般不易著色，通過加熱或者延長染色時間可以使其著色，然后再用3%鹽酸酒精處理后也是容易脫色的，經過染色后，結核分枝桿菌和其他分枝桿菌會呈現紅色狀態，而非抗酸菌和細胞雜則呈現藍色狀態。

抗酸染色會經過三個步驟：先是初染，然后是脫色，緊接著是復染。

抗酸染色的注意事項

1、每次抗酸染色試劑用完之后，一定要及時蓋好蓋子，以免揮發。

2、可以通過染色的時間和染色中的加熱程度也改善染色的顔色。?

3、染色劑都是對人的皮膚有傷害的，盡量避免與皮膚的接觸。可以通過穿實驗衣服，佩戴塑料透明眼睛，佩戴手套來保護自己。

4、一定在一個空曠的地方做實驗，可以有很好的發揮空間，也不會因為迸濺對他人造成傷害。